十全十美难,十全九美却可以通过选择一款好的转染试剂来实现。理想的转染试剂包括要具有较高的转染效率,细胞毒性低,操作简单可重复,价格还要可爱。现在大多数实验室用的是脂质体系列转染试剂,但脂质体对细胞毒性大,某些细胞的转染效率还很低,看单孔的价格也很不美好。尤其是在转染RNA方面,脂质体的劣势较明显。QIAGEN在转染试剂领域的研发思路与其核酸纯化领域的精而专,全而深不同。在转染试剂的研发过程中,另辟蹊径,研精致思进而做到小而美的转染产品。从市面上众多转染试剂的一片红海中,神奇的开辟出一块蓝海,为客户烹制出了几款高效、快速、低毒又亲民的转染试剂私房菜。转染试剂快速查找工具上线!真核细胞转染试剂配方
在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂(左图)和Lipofecatmine2000(L2K,右图)分别将GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所(RoswellCancerInstitute)的LynGao博士友情提供上海昆虫细胞转染试剂供应商从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。
LipoFectMax™转染试剂LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基转染效率高,适用于多种细胞系图1.LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。
转染产品知多少:转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程,是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大,我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内,也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔,使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品,适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统,是实验结果的重要影响因素。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。
转染48小时后,使用尼康荧光显微镜GFP荧光进行成像(左侧四幅图),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.带有6xHis标记的GFP荧光蛋白使用Ni-NTA亲和柱技术实现分离。5微升洗脱液载入SDS-PAGE凝胶电泳分离并进行Coomassie亮蓝染色(右上图E),道1为LipoD293293、道2为标准蛋白分子、道3为Xfect、道4为293fectin和道5为Fugene6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量(见右下图F)。产生慢***的比较通过LipoD293™试剂(升级版)和LipofectamineLTX(LTX)试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1微升(上图)和10微升(下图)。转染产品知多少:转染试剂选择工具.上海昆虫细胞转染试剂供应商
CycloFect转染试剂,你了解多少?真核细胞转染试剂配方
细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介:X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。优势:1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化真核细胞转染试剂配方
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